Het Amphitheatrum Castrense is een antiek Romeins amfitheater in Rome.
Naast het Colosseum is dit het tweede, nog bestaande amfitheater in de stad.
Het amfitheater is gebouwd in de eerste helft van de 3e eeuw, vermoedelijk onder Keizer Septimius Severus. Het hoorde bij het Sessorium, het keizerlijke paleis dat vlakbij het amfitheater gebouwd was. Het is een ongebruikelijk theater omdat het geheel uit bakstenen is gebouwd, in plaats van de meer gebruikelijke tufsteen. Het amfitheater heeft een elliptische vorm met een lengte van 88 en een breedte van 75,8 meter. De arena meet 68 bij 51 meter. Er konden ongeveer 3500 toeschouwers in plaats nemen. Dit waren waarschijnlijk voornamelijk leden van de keizerlijke hofhouding en hun familie.
Oorspronkelijk waren er 3 verdiepingen met 48 open arcaden. Evenals bij het Colosseum kon over de tribunes een groot zeil (velarium) worden gespannen, om de bezoekers te beschermen tegen de hitte van de zon. Tegen de façade waren pilasters en Corinthische zuilen gemetseld. Onder de vloer van de arena lagen de ondergrondse gangen en kerkers, waar de gladiatoren en wilde dieren voor hun optreden gevangen werden gehouden.
Tussen 271 en 275 werd een nieuwe stadsmuur om Rome gebouwd door Keizer Aurelianus. De muur kruiste ook de plaats waar het Amphitheatrum Castrense staat. In plaats van het amfitheater af te breken werd het simpelweg in de muur opgenomen, hiervoor werden de arcaden aan de buitenzijde van de muur dichtgemetseld en de tribunes en binnenmuur gesloopt. Dit was veel goedkoper en sneller dan een nieuw stuk muur te bouwen. Een aantal andere gebouwen onderging hetzelfde lot en deze werden ook in de stadsmuur opgenomen. Omdat de Aureliaanse Muur voor de verdediging van de stad altijd is onderhouden, is het Amphitheatrum Castrense ook blijven bestaan.
Tussen 1556 en 1557 werd het amfitheater om defensieve redenen verbouwd. De tweede en derde verdieping werden daarbij vrijwel geheel afgebroken. In de 18e eeuw lieten de monniken van het nabijgelegen klooster nog enkele delen afbreken, om ruimte te maken voor hun nieuwe huisversting.
Tegenwoordig rest alleen nog de buitenmuur. De derde verdieping is helemaal verdwenen en van de tweede rest slechts 1 arcade. De binnenmuur is wel weer herbouwd. Het amfitheater wordt nu als binnentuin gebruikt voor de pastorie van de basiliek Santa Croce in Gerusalemme en is niet toegankelijk voor publiek.
